Silenciamiento mediado por CRISPR-Cas9 de CD44 en células humanas de osteosarcoma altamente metastásico

Tipo: Las líneas celulares de osteosarcoma MNNG/HOS y 143B utilizadas en este estudio se adquirieron de ATCC

Dirigido hacia:  La línea celular MNNG/HOS se transformó con N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG), mientras que la línea celular 143B se transformó con Ki-ras

Dirigido por:  La guía U6gRNA-Cas9±2A-GFP del vector de expresión de proteína de fusión CRISPR-Cas9 y proteína verde fluorescente (GFP) por CD44 sgRNA (abreviado como CD44- Cas9-GFP)

Órgano o célula a tratar:  El grupo de diferenciación 44 (CD44) es un receptor para el ácido hialurónico (HA), y se ha demostrado que el CD44 unido a HA participa en diversas actividades tumorales biológicas, incluida la progresión tumoral, la metástasis y la quimio resistencia.

Vía de administración: Parenteral

Resultados: 

Para evaluar si CRISPR/Cas9 en conjunto con sgRNA de CD44 podía eliminar CD44, se realizó una transferencia Western. El ensayo demostró que la expresión de la proteína CD44 se inhibió significativamente en células MNNG/HOS transfectadas con CD44- Cas9-GFP. La expresión de CD44 de MNNG/HOS fue reprimida.

La eliminación de CD44 por CRISPR-Cas9 suprimió la actividad de migración e invasión de las células del osteosarcoma. La migración y la invasión son requisitos previos cruciales para la metástasis del osteosarcoma. La cicatrización de heridas mostró una inhibición sustancial cuando las células se transfectaron con CD44-Cas9-GFP.

Bibliografía:

1. Liu, T., Yan, Z., Liu, Y., Choy, E., Hornicek, F. J., Mankin, H. y Duan, Z. (2018). Silenciamiento mediado por CRISPR-Cas9 de CD44 en células humanas de osteosarcoma altamente metastásico. Fisiología celular y bioquímica: revista internacional de fisiología celular experimental, bioquímica y farmacología, 46(3), 1218–1230. https://doi.org/10.1159/000489072