Silenciamiento mediado por CRISPR-Cas9 de CD44 en células humanas de osteosarcoma altamente metastásico

Tipo: Las líneas celulares de osteosarcoma MNNG/HOS y 143B utilizadas en este estudio se adquirieron de ATCC

Dirigido hacia:  La línea celular MNNG/HOS se transformó con N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG), mientras que la línea celular 143B se transformó con Ki-ras

Dirigido por:  La guía U6gRNA-Cas9±2A-GFP del vector de expresión de proteína de fusión CRISPR-Cas9 y proteína verde fluorescente (GFP) por CD44 sgRNA (abreviado como CD44- Cas9-GFP)

Órgano o célula a tratar:  El grupo de diferenciación 44 (CD44) es un receptor para el ácido hialurónico (HA), y se ha demostrado que el CD44 unido a HA participa en diversas actividades tumorales biológicas, incluida la progresión tumoral, la metástasis y la quimio resistencia.

Vía de administración: Parenteral

Resultados: 

Para evaluar si CRISPR/Cas9 en conjunto con sgRNA de CD44 podía eliminar CD44, se realizó una transferencia Western. El ensayo demostró que la expresión de la proteína CD44 se inhibió significativamente en células MNNG/HOS transfectadas con CD44- Cas9-GFP. La expresión de CD44 de MNNG/HOS fue reprimida.

La eliminación de CD44 por CRISPR-Cas9 suprimió la actividad de migración e invasión de las células del osteosarcoma. La migración y la invasión son requisitos previos cruciales para la metástasis del osteosarcoma. La cicatrización de heridas mostró una inhibición sustancial cuando las células se transfectaron con CD44-Cas9-GFP.

Bibliografía:

1. Liu, T., Yan, Z., Liu, Y., Choy, E., Hornicek, F. J., Mankin, H. y Duan, Z. (2018). Silenciamiento mediado por CRISPR-Cas9 de CD44 en células humanas de osteosarcoma altamente metastásico. Fisiología celular y bioquímica: revista internacional de fisiología celular experimental, bioquímica y farmacología, 46(3), 1218–1230. https://doi.org/10.1159/000489072

Efectos de las células madre cardíacas en el sustrato arritmogénico postinfarto

Tipo de Célula:  células madre, específicamente las células derivadas de la cardiosfera (CDC)

Método de obtención: Los CDC se obtuvieron de explantes de tejido cardíaco de cerdos blancos grandes sacrificados.  El tejido se sometió a tres digestiones enzimáticas sucesivas con una solución de tripsina al 0,2% y colagenasa IV al 0,2% a 37 °C durante 5 min cada una. El tejido digerido se lavó y se cultivó con medio de explante completo a 37 °C y 5% de CO2.

Vía de administración: vías de administración de CDC en la remodelación ventricular izquierda compara las propiedades histológicas y electrofisiológicas de la cicatriz densa y el tejido heterogéneo entre un grupo de control y un grupo que recibió CDC por vía intracoronaria e intramiocárdica

Resultados: 

1. Los volúmenes ventriculares izquierdos y la fracción de eyección no fueron diferentes entre los grupos a las 4-16 semanas
2. Este estudio mostró que los CDC no eliminaron las cicatrices preexistentes, sino que modificaron la histología de la cicatriz densa, y la TH modificó el mecanismo de expansión de la cicatriz como lo sugiere la relación de los volúmenes de cicatrices densas entre las semanas 4 y 16.
3. Los CDC podrían retrasar el crecimiento de la cicatriz al bloquear la infiltración del tejido circundante por una cicatriz densa. En este sentido, la movilización de células madre en la zona del infarto puede proteger y prevenir el avance del deterioro tisular

Referencia

1. Arenal Á, Ríos-Muñoz GR, Carta-Bergaz A, Ruiz-Hernández PM, Pérez-David E, Crisóstomo V, et al. Effects of Cardiac Stem Cell on Postinfarction Arrhythmogenic Substrate. International Journal of Molecular Sciences [Internet] 2022;23(24):16211. Available from: http://dx.doi.org/10.3390/ijms232416211